甲苯胺藍(lán)染色液(百分之0.5,磷酸鹽法)

甲苯胺藍(lán)染色液(0.5%,磷酸鹽法)
貨號：G3662
規(guī)格：100ml
保存：室溫，避光，12 個月。

產(chǎn)品說明：
甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料, 屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個發(fā)色團(tuán)，從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用, 組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個發(fā)色團(tuán)，還含有兩個助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類, 幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力, 使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì)遇到甲苯胺藍(lán)可呈異染性紫紅色。

操作說明：（僅供參考）
(一) 肥大細(xì)胞染色
1、脫蠟蒸餾水。
2、浸染于甲苯胺藍(lán)染色液 10-15min，具體的染色時間根據(jù)切片厚度和組織的不同而定。
3、蒸餾水或去離子水輕輕沖洗。
4、 (可選)0.5%冰乙酸分化，直到細(xì)胞核和顆粒清晰可見。
5、快速 95%和無水乙醇脫水。
6、二甲苯透明，封固。
染色結(jié)果：肥大細(xì)胞呈紫紅色；背景呈淡藍(lán)色。

(二) 軟骨染色
1、 石蠟切片入二甲苯 2 次每次 15min。
2、 系列乙醇各 1min。
3、 自來水洗 2min。
4、 入 Toluidine Blue O Stain 浸染 30min。
5、 自來水洗 2min，濾紙吸干水分。
6、 丙酮分化軟骨細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見。
7、 逐級乙醇脫水。
8、 二甲苯透明，中性樹膠封固。
染色結(jié)果：軟骨、成骨細(xì)胞呈紫紅色；背景呈淡藍(lán)色。

(三) 細(xì)胞涂片染色
1、用 20%的乙醇溶液稀釋甲苯胺藍(lán)染色液, 一般要求稀釋到 0.1%即可。
2、細(xì)胞涂片后，立即放入 95%的乙醇中固定，取出放在紙巾上。
3、滴加稀釋后的甲苯胺藍(lán)染色液進(jìn)行滴染，加蓋玻片讓染料滲透到細(xì)胞中。
4、將玻片豎起，稍加壓力，使多余染料被紙巾吸去。
5、無需干燥，直接鏡檢。
染色結(jié)果：細(xì)胞核、淋巴細(xì)胞呈深藍(lán)色；核仁呈紫紅色；紅細(xì)胞呈橘紅；細(xì)胞質(zhì)、單核細(xì)胞呈淡藍(lán)色。

(四) 原位雜交染色
1、 用蒸餾水或去離子水稀釋到相應(yīng)的濃度，憑經(jīng)驗一般稀釋比例大于 1:100。
2、 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。
3、 在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。
4、 按需求進(jìn)行壓片固定。
注意事項：
1、使用本試劑時建議先取 1-2 個樣品做預(yù)實驗。
2、針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色，浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時間應(yīng)相應(yīng)延長。
3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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相關(guān)文獻(xiàn)：

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《Electroacupuncture promotes peripheral nerve regeneration after facial nerve crush injury and upregulates the expression of glial cell-derived neurotrophic factor》 作者:Jing Fei, Lin Gao, Huan-Huan Li, Qiong-Lan Yuan,and Lei-Ji Li, MD 期刊:Neural Regeneration Research 影響因子:2.472 PMID:30632508
 

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